Seleção do método de extração proteica para análise eletroforética de sementes de genótipos de Pinhão-manso
Palavras-chave:
Jatropha curcas L, proteínas inativadoras de ribossomos, SDS-PAGEResumo
Resumo: O objetivo do estudo foi extrair e purificar parcialmente as proteínas presentes nas sementes de Jatropha curcas L., selecionar o melhor método de extração para caracterizar o perfil eletroforético proteico de genótipos pertencentes ao Núcleo de Melhoramento Genético e Biotecnologia, priorizando as proteínas inativadoras de ribossomos (RIPs). A padronização foi conduzida em quatro modos, que se distinguiram na forma de extração das proteínas e nas soluções extratoras, sendo estas: I) Tampão Acetato de Sódio (0,45 M) e II), HCl (0,1%)/NaCl (0,6 M), III) NaOH (1M) e IV) Tampão fosfato-salino (PBS). O método de extração proteica com melhor resolução eletroforética foi com PBS, utilizando albúmen das sementes armazenadas. As concentrações de proteínas variaram de 2,75 a 5,15 mg/mL entre os genótipos, mas não divergiram estatisticamente entre si pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade. Pelo perfil eletroforético foi possível identificar as RIPs, com peso molecular de 28 kDa, em todos os genótipos avaliados. Perfis de bandas diferentes foram observados nos genótipos UFRB05 e UFRB15. O genótipo UFRB05 se destacou, quando associado com a qualidade das sementes armazenadas e teor de óleo.
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